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基礎(chǔ)信息Product information
產(chǎn)品名稱(chēng)：
兔腸道干細(xì)胞
產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
兔腸道干細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品：人B淋巴細(xì)胞瘤細(xì)胞+luc;RAMOS-LUC-PURO ISLR2蛋白抗體 人結(jié)腸癌組織源細(xì)胞 磷酸化蛋白激酶Aβ抗體 大鼠牙胚細(xì)胞 胰島β細(xì)胞生長(zhǎng)因子抗體 人胃癌組織成纖維細(xì)胞 NCK銜接蛋白1/2抗體
產(chǎn)品型號(hào)：
廠商性質(zhì)：經(jīng)銷(xiāo)商
訪問(wèn)量：1001
更新時(shí)間：2024-11-05
產(chǎn)品特性Product characteristics
兔腸道干細(xì)胞
商品屬性：
組織來(lái)源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
腸 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 球形 | YS-01X8325 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
兔腸道干分離自腸道組織；腸道指的是從胃幽門(mén)至門(mén)的消化管。腸是消化管中長(zhǎng)的一段，也是功能重要的一段。哺乳動(dòng)物的腸包括小腸、大腸和直腸3大段。大量的消化作用和幾乎全部消化產(chǎn)物的吸收都是在小腸內(nèi)進(jìn)行的，大腸主要濃縮食物殘?jiān)?，形成糞便，再通過(guò)直腸經(jīng)門(mén)排出體外。腸道堪稱(chēng)身體勞累的器官——每天不停地消化、吸收食物，以提供足夠的養(yǎng)分，其實(shí)它的功能還遠(yuǎn)不止此——它還是機(jī)體內(nèi)大的微生態(tài)系統(tǒng)。腸道干細(xì)胞（ISC）也稱(chēng)腸道上皮干細(xì)胞，主要位于腸黏膜隱窩內(nèi)，其與腸道黏膜上皮的更新和修復(fù)密切相關(guān)。正常情況下，位于隱窩基底部的腸道干細(xì)胞不斷向隱窩頂部（腸腔方向）遷移，整個(gè)遷移過(guò)程大約3-5d，在遷移過(guò)程中腸道干細(xì)胞分化形成不同的腸黏膜細(xì)胞。當(dāng)受到外界生理或病理信號(hào)作用時(shí)，ISC可持續(xù)增殖、分化為成熟腸上皮細(xì)胞，如腸型細(xì)胞、杯狀細(xì)胞、內(nèi)分泌細(xì)胞和潘氏細(xì)胞等，從而維持腸道黏膜結(jié)構(gòu)和功能的穩(wěn)定性。
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過(guò)充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些，至少為5×108細(xì)胞/L；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落，漂??；
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應(yīng)將原代細(xì)胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞；
2、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行；
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi)，進(jìn)行分瓶試驗(yàn)；
4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí)，淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子，白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清，以利細(xì)胞生長(zhǎng)；
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。
方法簡(jiǎn)介：
實(shí)驗(yàn)室分離的兔腸道干采用-膠原酶聯(lián)合消化后，用腸道干細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)：
實(shí)驗(yàn)室分離的兔腸道經(jīng)MSI-1免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基：含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性：懸浮
細(xì)胞形態(tài)：球形
傳代特性：可傳3代左右
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
兔腸道干體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專(zhuān)用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞傳代及凍存：
| 細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
| 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠催產(chǎn)素(OT)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠巨噬細(xì)胞性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠Ⅰ型膠原N末端肽(X)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠5核苷酸酶(5-)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠降鈣素原(PCT)ELISA 試劑盒 96T/48T
People mumps virus IgG ELISA Kit 人腮腺病毒IgG 試劑盒
HumanmembraneIgD,mIgDELISAKit 人表面膜免疫球蛋白D(mIgD)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humanai-cytomegalovirusIgMaibody,ai-CMVIgM試劑盒人抗巨細(xì)胞病毒抗體IgM(ai-CMVIgM)試劑盒規(guī)格：96T/48T
植物基因組DNA化試劑盒(高多糖/酚)50次
Humanα1-Acidglycoprotein,α1-AGPELISAKit人內(nèi)皮型合成酶3(eNOS-3)試劑盒規(guī)格：96T/48T
RNA結(jié)合蛋白10抗體
細(xì)胞角蛋白24抗體
SELE重組小鼠 E-Selectin / CD62e / SELE 蛋白 Protein
肌球蛋白輕鏈激酶(MYLK)重組蛋白 Recombinant Myosin Light Chain Kinase (MYLK)
APP重組人 Beta-amyloid 38 / Beta-APP38 蛋白 (aa 672-709, His & GST 標(biāo)簽) Protein
EIF4EBP1 Protein Human 重組人 4E-BP1 / EIF4EBP1 蛋白
TNFRSF9 Protein Canine 重組狗 CD137 / 4-1BB / TNFRSF9 蛋白
肌球蛋白輕鏈激酶(MYLK)重組蛋白 Recombinant Myosin Light Chain Kinase (MYLK)
EIF4EBP1 Protein Human 重組人 4E-BP1 / EIF4EBP1 蛋白
SELE重組小鼠 E-Selectin / CD62e / SELE 蛋白 Protein
TNFRSF9 Protein Canine 重組狗 CD137 / 4-1BB / TNFRSF9 蛋白
APP重組人 Beta-amyloid 38 / Beta-APP38 蛋白 (aa 672-709, His & GST 標(biāo)簽) Protein
兔腸道干細(xì)胞大鼠β干擾素(IFN-β/IFNB)試劑盒 ，英文名： IFN-β/IFNB ELISA Kit
Mouse leinizing hormone (LH) ELISA Kit 小鼠促黃體激素(LH)試劑盒
ELISA 小鼠(mouse NO) 進(jìn)口分裝
CLIAKitforIL-11(HumanIerleukin11)ELISAKIT人白介素11
通用型馬皰疹病毒(EquineHerpesVirusType1)試劑盒20次
ELISAKitVEGFR-2大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體2
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