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基礎(chǔ)信息Product information
產(chǎn)品名稱：
大鼠外周血巨噬細胞
產(chǎn)品簡介：
大鼠外周血巨噬細胞公司正在出售的產(chǎn)品：小鼠腎成纖維細胞 蛋白Z抗體 MGC80-3 (人胃癌細胞) (Hela污染細胞系) 大鼠尿道上皮細胞 DMS 53人肺癌細胞 大鼠胰腺導管上皮細胞 MDA-MB-157 (人乳腺癌細胞) 豬成骨細胞
產(chǎn)品型號：
廠商性質(zhì)：經(jīng)銷商
訪問量：798
更新時間：2024-11-05
產(chǎn)品特性Product characteristics
大鼠外周血巨噬細胞
商品屬性：
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
外周血 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 巨噬細胞樣 | YS-01X8264 |
細胞簡介：
大鼠外周血巨噬分離自外周血；外周血是除骨髓之外的血液，臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細胞釋放到血液中，再在從血液中提取分離得到造血干細胞，我們把這樣得到的干細胞稱為外周血干細胞，在二十一世紀初人類開始的生命方舟計劃中提出外周血這一新概念。巨噬細胞屬免疫細胞，有多種功能，是研究細胞吞噬、細胞免疫和分子免疫學的重要對象。巨噬細胞較易獲得，便于培養(yǎng)，并可進行純化。巨噬細胞屬不繁殖細胞群，在條件適宜下可生活2-3周，多用做原代培養(yǎng)，難以長期生存。巨噬細胞（Macrophages）是一種位于組織內(nèi)的白血球，源自單核細胞，而單核細胞又來源于骨髓中的前體細胞。巨噬細胞和單核細胞皆為吞噬細胞，在脊椎動物體內(nèi)參與非特異性防衛(wèi)（先天性免疫）和特異性防衛(wèi)（細胞免疫）。它們的主要功能是以固定細胞或游離細胞的形式對細胞殘片及病原體進行噬菌作用（即吞噬以及消化），并激活淋巴球或其他免疫細胞，令其對病原體作出反應。
方法簡介：
實驗室分離的大鼠外周血巨噬采用取外周血、通過密度梯度離心法、差速貼壁、細胞因子誘導法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
實驗室分離的大鼠外周血巨噬經(jīng)CD68免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基：含FBS、M-CSF、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態(tài)：巨噬細胞樣
傳代特性：屬于終末分化細胞；屬于不增殖細胞群
消化液：（12mM）
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
大鼠外周血巨噬體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的優(yōu)良培養(yǎng)狀態(tài)。
細胞傳代及凍存：
| 細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
| 如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠半乳糖凝集素-9(mouse Galectin-9) 作用： ELISA 規(guī)格： 進口分裝
小鼠胃泌素(mouse Gasin) 作用： ELISA 規(guī)格： 進口分裝
小鼠Ghrelin(mouse Ghrelin) 作用： ELISA 規(guī)格： 進口分裝
小鼠胰高血糖素樣肽-1(mouse GLP-1) 作用： ELISA 規(guī)格： 進口分裝
小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子3(TIMP-3)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human neuraminidase (NA) ELISA Kit 人神經(jīng)酶(NA)試劑盒
HumanleukocyteaigenE,HLA-EELISAKit 人類白細胞抗原E(HLA-E)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humanai-hepatitisAvirusIgMaibody,ai-HAV試劑盒人抗甲型肝病毒IgM抗體(ai-HAV)試劑盒規(guī)格：96T/48T
植物0酸葡萄糖酸脫氫酶(phosphogluconatedehydrogenase;PGD)電泳分析試劑盒5次
Humanverylowdensitylipoproteieceptor,VLDLRELISAKit人極低密度脂蛋白受體(VLDLR)試劑盒規(guī)格：96T/48T
B淋巴細胞酪激酶抗體
腦膠質(zhì)瘤相關(guān)蛋白抗體（鋅指蛋白5）
IL21R重組大鼠 IL-21R / Interleukin-21 Receptor 蛋白 Protein
Ghrelin 腦腸肽(一種新的生長激素釋放肽 0.5mgGhrelin 腦腸肽(一種新的生長激素釋放肽)多肽抗原
KLK8重組人 KLK-8 / Kallikrein-8 蛋白 Protein
EPHA4 Protein Human 重組人 EphA4 / HEK8 蛋白 (aa 570-986, His & GST 標簽)
FLT4 Protein Mouse 重組小鼠 VEGFR3 / FLT-4 蛋白 (Fc 標簽)(Fc 標簽)
Ghrelin 腦腸肽(一種新的生長激素釋放肽 0.5mgGhrelin 腦腸肽(一種新的生長激素釋放肽)多肽抗原
EPHA4 Protein Human 重組人 EphA4 / HEK8 蛋白 (aa 570-986, His & GST 標簽)
IL21R重組大鼠 IL-21R / Interleukin-21 Receptor 蛋白 Protein
FLT4 Protein Mouse 重組小鼠 VEGFR3 / FLT-4 蛋白 (Fc 標簽)(Fc 標簽)
KLK8重組人 KLK-8 / Kallikrein-8 蛋白 Protein
大鼠外周血巨噬細胞大鼠白介素28B(IL-28B)試劑盒 ，英文名： IL-28B ELISA Kit
Mouse ierleukin 8 (IL-8/CXCL8) ELISA Kit 小鼠白介素8(IL-8/CXCL8)試劑盒
ELISA 小鼠類胰島素生長因子結(jié)合蛋白-3(mouse IGBPF-3) 進口分裝
CLIAKitforIMA(HumanIschemiaModifiedAlbumin)ELISAKit人缺血修飾白蛋白
通用型胱(cystine)含量比色法定量試劑盒20次
ELISAKitINH-B大鼠抑制素B
原代細胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細胞接種時濃度要稍大一些，至少為5×108細胞/L；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落，漂??；
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應將原代細胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時，應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞；
2、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行；
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi)，進行分瓶試驗；
4、長期培養(yǎng)時，淋巴細胞中要加入生長因子，白血病細胞中要加入少量的原患者血清，以利細胞生長；
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行
